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2016-09-01人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒样本处理及操作要求

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将来商城人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒
实验前样本的处理方法在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟后、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成、应再次离心。 

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂、混合10-20分钟后、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。  

3.尿液:用无菌管收集、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成、应再次离心、胸腹水、脑脊液参照此实行。  

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时、用无菌管收集、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清。  

5.培养细胞:检测细胞内的成份时、用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液、细胞浓度达到100万/ml左右、通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂、以使细胞破坏并放出细胞内成份、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。  

6.组织标本:切割标本后、称取重量、加入一定量的PBS、PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用、标本融化后仍然保持2-8℃的温度、加入一定量的PBS(PH7.4)、或组织蛋白萃取试剂、用手工或匀浆器将标本匀浆化、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、分装后一份待检测、其余冷冻备用。

人巨噬细胞集落刺激因子试剂盒产品介绍

人巨噬细胞集落刺激因子试剂盒操作
人巨噬细胞集落刺激因子试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。


人巨噬细胞集落刺激因子试剂盒性能
1、灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为
1.0 pg/mL
2、特异性:不与其它细胞因子反应。
3、重复性:板内、板间变异系数均小于10%。


文章关键词:人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒,试剂盒操作方法,操作注意事项

推荐产品如下:
商品编号 产品名称 实验方法 灵敏度
JL11124 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒 夹心法 1.0 pg/mL
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